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干货分享:氨丁三醇(Tris)及盐酸氨丁三醇(Tris-HCl)固体粉末配置缓冲液

更新时间:2023-10-26   点击次数:2327次

AVT团队向您推荐一种操作简便且复现性较好的缓冲液配制方法:使用氨丁三醇(Tris)及盐酸氨丁三醇(Tris-HCl)固体粉末进行配制。

 

使用时,可根据目标浓度及pH,计算并直接称取两种固体粉末混合,溶解定容,至于两种固体粉末的用量如何确认,您可以参考以下实验步骤以及艾伟拓实验室实测值,通过一个简单的预实验进行确认:

 

1. 分别配制目标浓度的Tris与Tris-HCl(这里以0.1mol/L为例)

 

 

2. 两种溶液分别取不同体积混合成相同体积(这里以100mL为例)的缓冲液,测定溶液pH

 

 

待摸索出两种溶液适宜比例后,根据计划配置的缓冲液体积,倒算两种固体粉末的用量。

 

基于该方法,我们复现了Moderna的xinguanmRNA疫苗中的Tris缓冲溶液,pH理论值为7~8,实测值为7.47(注:该实测值为溶液中only包含Tris/Tris-HCl,不含mRNA-LNP及其他辅料情况下的pH值)。

该方法的优势是操作简便,只需称取及溶解两步,在外界温度及溶液浓度相同的情况下,复现性较好,且无需使用浓盐酸等严格受限的试剂。

 

使用该方法配置Tris/Tris-HCl缓冲液的注意事项如下:

 

①为避免Tris-HCl含量波动等因素造成配置的缓冲液pH不稳定,建议采购质量可靠的药用级Tris及Tris-HCl产品。

 

②浓度及温度对Tris缓冲液pH均有较大影响,建议做上述实验时,保持与实际使用场景相同的温度与浓度,并在配置完成后最快时间进行测量,避免二氧化碳的干扰。

 

③若变更使用浓度或环境温度,需重新进行上述实验。

艾伟拓(上海)医药科技有限公司

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